双缩脲试剂

用于鉴定蛋白质的分析化学试剂
双缩[niào]试剂是一种用于鉴定蛋白质分析化学试剂。它是一种碱性的含铜试液,呈蓝色,由0.1 g/mL氢氧化钠氢氧化钾、0.01 g/mL硫酸铜酒石酸钾钠配制而成。
双缩脲试剂本是用来检测双缩脲,由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,因此也能与铜离子在碱性溶液中发生双缩脲反应。当底物中含有肽键时,试液中的铜与多肽配位,络合物呈紫色。可通过比色法分析浓度,在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵敏度为5-160mg/ml。
双缩脲试剂中真正起作用的是硫酸铜,而氢氧化钾仅仅是为了提供碱性环境,因此它可被其他碱,如氢氧化钠所代替。向试剂中加入碘化钾,会延长试剂的使用寿命。酒石酸钾钠的作用是保护反应生成的络离子不被析出变为沉淀,从而使试剂失效。

简介

血清蛋白测定(双缩脲法)试剂:球蛋白沉淀剂同上页酚试剂法。双缩脲试剂:硫酸铜(CuSO4·5H2O,三级试剂)1.5克,酒石酸钾钠(KNaC4H生O6·4H2O,三级试剂)6.0克2.5N氢氧化钠,300毫升,蒸馏水。将硫酸铜及酒石酸分别各以200毫升蒸馏水溶解,必要时过滤,全部倾入1,000毫升容量瓶中,混匀。再加入氢氧化钠溶液并以蒸馏水稀释至1,000毫升刻度。分装塑料或内壁涂蜡的试剂瓶,加塞密封,于室温保存。若溶液中出现暗红色沉淀即不宜再用。