非组蛋白

对DNA具有识别特异性的蛋白质
非组蛋白是细胞核中组蛋白以外的蛋白,包括以DNA 为底物的酶以及作用于组蛋白的一些酶,如组蛋白甲基化酶,此外还有DNA 结合蛋白、组蛋白结合蛋白和调控蛋白。非组蛋白具有多样性和异质性,不同组织细胞中其种类和数目都不相同。非组蛋白对DNA 具有识别特异性,识别信息来源于DNA 核[gān]酸序列本身,识别位点存在于DNA 双螺旋的大沟部分。识别与结合靠氢键离子键。在不同的基因组之间,这些非组蛋白所识别的DNA 序列是保守的。非组蛋白具有多方面的重要功能,包括基因表达的调控和染色质高级结构的形成,如帮助DNA 分子折叠,以形成不同的结构域协助启动DNA 复制,控制基因转录,调节基因表达。

检测

首先制备一段带有放射性标记的已知特异序列的DNA,将要检测的细胞抽提物与标记DNA混合,进行凝胶电泳
未结合蛋白的自由DNA在凝胶上迁移最快,而与蛋白质结合的DNA迁移慢,一般结合的蛋白质分子越大,DNA分子的延滞现象越明显,然后通过放射性自显影分析,即可发现一系列DNA带谱,每条带分别代表不同的DNA-蛋白质复合物。每条带相对应的结合蛋白随后再通过细胞抽提物组分分离方法被进一步分开。

特性