尿卟啉原
血红素合成中产生物质
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正文
以４０￣７０％饱和度硫酸铵分级沉淀、ＤＥＡＥＳｅｐｈａｒｏｓｅｉＣｌ－６Ｂ、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００、羟基磷灰石、ＰｈｅｎｙｌＳｅｐｈａｒｏｓｅＣｌ－４Ｂ和制备电泳分离纯化了小麦的尿卟啉原Ⅲ酶（ＵＲＯＳ）。酶的亚基分子质量为５４ｋｕ，全酶分子质量为６６ｋｕ，酶的等电地比活为２５７μｍｏｌ／（ｍｇ·ｍｉｎ），最适反应温度４０℃，５ｍｍｏｌ／Ｌ的巯基乙醇和Ｍｇ＾２＋促进酶活，纯化的小麦ＵＲＯＳ在－２。
介绍
高等植物利用土壤中的硝酸盐需要经过两个步骤，首先在细胞质中，硝酸还原酶(NR)将硝酸盐还原为亚硝酸盐，然后在质体中，亚硝酸还原酶(NiR)将亚硝酸盐还原为氨，两种基因的表达受不同的环境诱导。亚硝酸还原酶由两个亚基组成，其辅基由西罗血红素(sirohaem)和一个4Fe24S簇组成，西罗血红素的作用是使6个电子转移到底物亚硝酸上。尿卟啉原Ⅲ甲基转移酶参与亚硝酸还原酶的辅基西罗血红素(sirohaem)的生物合成途径。大肠杆菌中最早发现的特异性参与西罗血红素合成的基因是cysG,它是在分离半胱氨酸营养缺陷株的过程中发现的，同时检测到该突变株不能够利用硝酸盐作为氮源。大肠杆菌的cysG基因与亚硝盐还原酶nirB基因位于同一个转录单元，对cysG基因产物功能的研究发现，它是一个三功能酶，催化尿卟啉原Ⅲ转化为西罗血红素。全酶共457个氨基酸，由两部分组成,C端结构域CysGA是从第202个氨基酸到第457个，催化SAM依赖的甲基化反应.N端结构域CysGB是前201个氨基酸，催化NAD+依赖的脱氢反应。在其他的细菌中，这类基因如cobA,corA,COBI,cobM也被发现[5-9],它们编码的蛋白都只有CysGA同源结构域.