反转录病毒
RNA病毒之一
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逆转录病毒（Retrovirus），别名反转录病毒，是一类RNA病毒，其基因组两端为长末端重复序列（LTR），病毒颗粒呈球形，直径大约100nm，具有包膜和表面刺突。该病毒的基因组包含三个主要基因：gag基因负责编码病毒的核心蛋白；pol基因编码逆转录酶；env基因则编码病毒的被膜糖蛋白。逆转录病毒的包装和纯化过程通常采用三质粒或四质粒系统，通过收集细胞培养上清并使用超速离心技术进行浓缩和纯化，以收集病毒颗粒。[1]
逆转录病毒的滴度检测通常采用定量PCR方法，通过检测干扰后细胞基因组中外源DNA的拷贝数来进行。实验原理基于逆转录病毒介导的外源基因通过逆转录方式整合进入目的细胞基因组。在基因表达过程中，逆转录病毒首先在逆转录酶的作用下将RNA逆转录成DNA，形成DNA整合前复合体，然后进入细胞核并随机整合到宿主细胞DNA上，随后通过转录和翻译过程完成基因的表达。[1]
逆转录病毒具有特异性感染分裂期细胞的特点，这是因为只有在细胞分裂期间，病毒DNA基因组才能接触到宿主细胞的遗传物质。基于这一特性，逆转录病毒在干细胞研究领域，如神经干细胞和造血干细胞研究中得到了广泛应用。此外，逆转录病毒也适用于成年新生神经元或胶质前体细胞的研究。在体内应用方面，逆转录病毒可用于研究卒中后早期治疗对白质和认知功能的影响，其中使用的病毒载体为pROV-EF1a-GFP，病毒滴度达到1E+8 cfu/mL，注射体积为1μL。[1]